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廣州鴻程生物有限公司一家專注于生命科學的科技企業,由在國內科研試劑領域有著豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成,專營進口生物試劑,科學儀器,實驗消耗品等。公司將不斷把上優質的產品引入國內市場,滿足客戶的需求,公司也將緊跟生命科學的發展,為廣大科研工作者探索生命科學的奧秘奉獻綿薄之力.專門從事以抗cuxiao Beckman A63881的磁珠 現貨,moltox 11-101.5等現貨,transgenomic 706020/706025現貨,Megazyme的大部分現貨,LIST現貨,、ALZET大量現貨,Avanti 、tedpella 、BioLegend、Polyplus、jena bioscience、Mattek、MRC-Holland、polysciences、enzo、novus、TOCRIS、CAYMAN、Neuro Probe、cyguns、eylabs、NIBSC、chondrex、lc laboratories、BTI、etonbio
美國polysciences公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
轉染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966轉染效率zui高。
下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產品特性及其溶液的配制過程。
1. 產品特性:
產品名稱:線性聚乙烯亞胺(PEI)
CAS號 | 9002-98-6,26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n | 分子量 | 25000 |
熔點 | 73-75°C | 外觀 | 白色或黃色固體 | 結構式 |
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溶解性 | 溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和丙酮 | 儲存 | 室溫 |
2. 溶液配制
此指導說明書是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。
材料:
1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵
配制過程:
1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解)——冷卻至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝,-20°C保存。
備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。
試劑儲存:
冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。
粉末儲存:
未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。