Megazyme試劑盒的檢測原理:
脫脂干燥后的樣品經熱穩(wěn)定a-淀FEN酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化,酶解液通過乙醇沉淀、過濾,乙醇和丙酮洗滌殘渣后干燥、稱重,得到總膳食纖維(TDF)殘渣;
酶解液通過直接過濾、熱水洗滌殘渣,干燥后稱重,得到不溶性膳食纖維殘渣;
濾液用乙醇沉淀,過濾、干燥、稱重,得到可溶性膳食纖維殘渣。
TDF、IDF和SDF的殘渣扣除蛋白質、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。
Megazyme試劑盒的技術特性:
(1)、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2)、結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3)、酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4)、受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5)、此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6)、加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度,并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。